Calculateur de Concentration Protéique

Outil de Quantification Protéique Précis

Calculez la concentration protéique en utilisant plusieurs méthodes : A280, Bradford, BCA et Lowry. Entrez vos données et obtenez des résultats instantanés et fiables pour vos besoins de laboratoire.

Exemples de Calculs

Essayez ces ensembles de données d'exemple pour voir comment fonctionne le calculateur

A280 Direct Measurement

Mesure Directe A280

Calculate protein concentration using A280 absorbance for BSA.

Méthode: A280 (Absorbance UV)

Absorbance (A280): 0.85

Coefficient d'Extinction: 43824 M⁻¹cm⁻¹

Poids Moléculaire: 66000 Da

Facteur de Dilution: 1

Longueur de Trajet: 1 cm

Bradford Assay with Standard Curve

Dosage Bradford avec Courbe d'Étalonnage

Determine protein concentration using Bradford assay and standard curve.

Méthode: Dosage Bradford

Absorbances des Standards: 0.05, 0.12, 0.21, 0.32

Concentrations des Standards: 0.1, 0.2, 0.4, 0.8 mgml

Absorbance de l'Échantillon: 0.27

BCA Assay Example

Exemple de Dosage BCA

Protein quantification using BCA assay and standard curve.

Méthode: Dosage BCA

Absorbances des Standards: 0.04, 0.11, 0.19, 0.29

Concentrations des Standards: 0.1, 0.25, 0.5, 1.0 mgml

Absorbance de l'Échantillon: 0.22

Lowry Assay Example

Exemple de Dosage Lowry

Protein concentration calculation using Lowry assay.

Méthode: Dosage Lowry

Absorbances des Standards: 0.06, 0.13, 0.22, 0.35

Concentrations des Standards: 0.2, 0.4, 0.8, 1.6 mgml

Absorbance de l'Échantillon: 0.28

Autres titres
Comprendre la Concentration Protéique : Un Guide Complet
Maîtrisez la quantification protéique avec plusieurs méthodes et bonnes pratiques

Qu'est-ce que la Concentration Protéique ?

  • Définition et Importance
  • Méthodes de Mesure
  • Applications en Recherche
La concentration protéique fait référence à la quantité de protéine présente dans une solution, généralement exprimée en mg/mL ou μg/μL. Une quantification précise est essentielle pour les expériences biochimiques, la purification protéique et les dosages enzymatiques.
Pourquoi Mesurer la Concentration Protéique ?
Connaître la concentration protéique exacte assure la reproductibilité et la fiabilité dans la recherche, les diagnostics et les applications industrielles. C'est un paramètre critique en biologie moléculaire, biochimie et biotechnologie.
Méthodes de Mesure Courantes
Les méthodes les plus courantes incluent l'absorbance A280 (pour les protéines pures), et les dosages colorimétriques tels que Bradford, BCA et Lowry, qui nécessitent une courbe d'étalonnage pour la quantification.

Exemples de Mesure

  • A280 pour BSA purifié
  • Dosage Bradford pour lysat cellulaire
  • BCA pour préparations enzymatiques

Guide Étape par Étape pour Utiliser le Calculateur de Concentration Protéique

  • Sélectionner la Méthode
  • Entrer les Données
  • Interpréter les Résultats
Notre calculateur prend en charge quatre méthodes majeures de quantification protéique. Sélectionnez la méthode appropriée en fonction du type d'échantillon et des données disponibles.
Méthode A280
Pour les protéines pures, entrez l'absorbance à 280 nm, le coefficient d'extinction, le poids moléculaire, le facteur de dilution et la longueur de trajet. Le calculateur utilise la loi de Beer-Lambert pour la quantification directe.
Dosages Colorimétriques (Bradford, BCA, Lowry)
Pour ces dosages, entrez les absorbances et concentrations des standards, et l'absorbance de votre échantillon inconnu. Le calculateur ajuste une régression linéaire aux standards et calcule la concentration de l'échantillon.
Interprétation des Résultats
Le résultat inclut la concentration protéique, l'équation de courbe d'étalonnage et la valeur R² pour la qualité d'ajustement de la courbe. Utilisez ces éléments pour évaluer la fiabilité de votre quantification.

Exemples d'Utilisation

  • A280 : Calcul direct pour BSA
  • Bradford : Courbe d'étalonnage pour lysat cellulaire
  • BCA : Haute sensibilité pour échantillons dilués

Applications Réelles des Calculs de Concentration Protéique

  • Purification Protéique
  • Cinétique Enzymatique
  • Diagnostics
La quantification protéique est vitale dans les workflows de purification protéique, les dosages d'activité enzymatique et les tests diagnostiques. Une mesure précise assure la préparation correcte des réactifs et la reproductibilité expérimentale.
Purification Protéique
Pendant la purification, la concentration protéique est surveillée pour évaluer le rendement et la pureté. Le calculateur aide à suivre ces paramètres à chaque étape.
Cinétique Enzymatique
Les dosages enzymatiques nécessitent une quantification protéique précise pour déterminer l'activité spécifique et les paramètres cinétiques.
Diagnostics Cliniques
Les tests diagnostiques reposent souvent sur la quantification protéique, comme l'albumine dans le sang ou l'urine. Des résultats fiables sont essentiels pour les soins aux patients.

Exemples d'Applications

  • Surveillance de purification par affinité
  • Normalisation d'activité enzymatique
  • Quantification d'albumine en diagnostics

Idées Fausses Courantes et Méthodes Correctes

  • Limitations A280
  • Pièges de Courbe d'Étalonnage
  • Erreurs de Préparation d'Échantillon
Les idées fausses dans la quantification protéique peuvent conduire à des résultats inexacts. Comprendre les limitations des méthodes et les bonnes pratiques est crucial.
A280 est Seulement pour les Protéines Pures
La méthode A280 est précise seulement pour les protéines pures sans substances interférentes. Les contaminants comme les acides nucléiques ou les détergents peuvent fausser les résultats.
La Courbe d'Étalonnage Doit Être Linéaire
Assurez-vous que vos standards couvrent la plage attendue de l'échantillon et que la courbe est linéaire. Les valeurs aberrantes ou les régions non linéaires réduisent la précision.
Erreurs de Dilution
Tenez toujours compte des facteurs de dilution et utilisez un pipetage précis. De petites erreurs peuvent affecter significativement les valeurs de concentration finales.

Lignes Directrices de Bonnes Pratiques

  • Évitez A280 pour les lysats bruts
  • Vérifiez R² pour la courbe d'étalonnage
  • Utilisez des standards frais pour chaque dosage

Dérivation Mathématique et Exemples

  • Loi de Beer-Lambert
  • Régression Linéaire pour Courbes d'Étalonnage
  • Analyse d'Erreur
La quantification protéique repose sur des principes mathématiques établis. Comprendre ceux-ci aide à diagnostiquer et optimiser vos expériences.
Loi de Beer-Lambert (A280)
C = (A × DF × MW) / (ε × l), où C est la concentration (mg/mL), A est l'absorbance, DF est le facteur de dilution, MW est le poids moléculaire, ε est le coefficient d'extinction, et l est la longueur de trajet (cm).
Régression Linéaire pour Courbes d'Étalonnage
Pour les dosages colorimétriques, une courbe d'étalonnage est générée en traçant l'absorbance vs la concentration. La régression linéaire donne l'équation y = mx + b, utilisée pour calculer les concentrations inconnues.
Évaluation de l'Ajustement de Courbe
La valeur R² indique la qualité d'ajustement. Les valeurs proches de 1,0 indiquent une courbe d'étalonnage fiable.

Exemples de Calculs

  • A280 : C = (0,85 × 1 × 66000) / (43824 × 1) = 1,28 mg/mL
  • Bradford : y = 1,02x + 0,03, échantillon A = 0,27, C = (0,27-0,03)/1,02 = 0,24 mg/mL
  • BCA : R² = 0,998 indique un excellent ajustement