蛋白质溶解度与缓冲液优化计算器

通过优化溶液条件最大化您的蛋白质产量。

输入您的蛋白质和缓冲液参数以估算溶解度并获得优化建议。

示例

了解不同条件如何影响蛋白质溶解度。

PBS中的BSA,中性pH

蛋白质

牛血清白蛋白(BSA)在磷酸盐缓冲盐水中,pH 7.4,25°C,0.15M NaCl。

蛋白质含量: 10 mg

溶剂体积: 1 mL

pH值: 7.4

温度(°C): 25

盐(M): 0.15

等电点(pI): 4.7

疏水性指数: 0.42

酸性pH下的溶菌酶

蛋白质

溶菌酶在水中,pH 4.5,20°C,无添加盐。

蛋白质含量: 5 mg

溶剂体积: 2 mL

pH值: 4.5

温度(°C): 20

盐(M): 0

等电点(pI): 11

疏水性指数: 0.35

高盐下的IgG

蛋白质

免疫球蛋白G在缓冲液中,pH 7.0,4°C,1.0M NaCl。

蛋白质含量: 2 mg

溶剂体积: 0.5 mL

pH值: 7

温度(°C): 4

盐(M): 1

等电点(pI): 6.8

疏水性指数: 0.55

pI附近的酪蛋白

蛋白质

酪蛋白在缓冲液中,pH 4.6(接近pI),37°C,0.1M NaCl。

蛋白质含量: 8 mg

溶剂体积: 1 mL

pH值: 4.6

温度(°C): 37

盐(M): 0.1

等电点(pI): 4.6

疏水性指数: 0.6

其他标题
理解蛋白质溶解度与缓冲液优化:综合指南
掌握在溶液中最大化蛋白质产量的科学。

什么是蛋白质溶解度?

  • 定义和重要性
  • 影响溶解度的因素
  • 在生物化学中的作用
蛋白质溶解度是指在特定条件下蛋白质在给定溶剂中可以溶解的最大量。这是生物化学、生物技术和药物研究中的关键参数。
为什么蛋白质溶解度很重要?
溶解度决定了蛋白质纯化、结晶和配方的效率。溶解度差可能导致聚集、沉淀和功能丧失。

实际例子

  • BSA在中性pH下高度可溶,但在其pI附近沉淀。
  • 溶菌酶由于其高pI而在酸性pH下保持可溶。

使用计算器的分步指南

  • 输入参数
  • 计算过程
  • 解释结果
首先输入蛋白质含量、溶剂体积、pH值、温度、盐浓度,以及(可选)pI和疏水性指数。计算器估算溶解度并提供优化建议。
如何使用计算器
调整参数以了解每个参数如何影响溶解度。使用示例作为指导。

使用技巧

  • 增加盐浓度可能降低某些蛋白质的溶解度。
  • 在等电点(pI)处溶解度最低。

蛋白质溶解度的实际应用

  • 蛋白质纯化
  • 药物配方
  • 生物技术研究
蛋白质溶解度在设计纯化方案、开发稳定药物配方和进行蛋白质化学研究方面至关重要。
实验室和工业中的应用
优化溶解度可以提高蛋白质产品的产量、稳定性和功效。

应用场景

  • 配制用于注射的单克隆抗体。
  • 结晶酶用于结构研究。

常见误解和正确方法

  • 关于溶解度的误解
  • 最佳实践
  • 故障排除
一个常见的误解是更高的盐总是增加溶解度。实际上,盐可以增加(盐溶)和减少(盐析)蛋白质溶解度,具体取决于浓度和蛋白质类型。
避免常见陷阱
始终考虑蛋白质的pI、疏水性和缓冲液组成。在实验前使用计算器测试不同场景。

误解

  • 添加过多盐可能导致蛋白质沉淀。
  • 在pI附近操作通常导致聚集。

数学推导和例子

  • 溶解度公式
  • 参数效应
  • 计算例子
基本溶解度公式是:溶解度 = 蛋白质含量 / 溶剂体积。然后根据pH值、温度、盐、pI和疏水性使用经验或基于文献的因素调整此值。
计算例子
对于在pH 7.4、25°C、0.15M NaCl的1 mL PBS中的10 mg BSA,估算溶解度很高。在pI附近或高盐下,溶解度降低。

计算例子

  • 溶解度 = 10 mg / 1 mL = 10 mg/mL(调整前)
  • 调整pH值、盐和温度以获得更准确的结果。