酶活性与比活性计算器

从吸光度、体积等计算酶活性(U)和比活性(U/mg)。

输入您的实验数据以确定酶活性,如果需要,还可以计算比活性。所有计算都基于标准酶动力学公式。

示例

查看如何使用真实数据计算酶活性。

标准酶活性计算

标准

从吸光度变化、总体积、消光系数、光程长度、酶体积和时间计算酶活性。

ΔA (吸光度变化): 0.25

总体积 (mL): 3 mL

消光系数 (M⁻¹cm⁻¹): 6220 M⁻¹cm⁻¹

光程长度 (cm): 1 cm

酶体积 (mL): 0.1 mL

时间 (分钟): 5 min

比活性计算

比活性

在提供蛋白质含量的情况下计算酶活性和比活性。

ΔA (吸光度变化): 0.18

总体积 (mL): 2.5 mL

消光系数 (M⁻¹cm⁻¹): 5400 M⁻¹cm⁻¹

光程长度 (cm): 1 cm

酶体积 (mL): 0.08 mL

时间 (分钟): 4 min

蛋白质含量 (mg): 0.4 mg

高酶活性示例

高活性

吸光度变化大且反应时间短的情况。

ΔA (吸光度变化): 0.45

总体积 (mL): 4 mL

消光系数 (M⁻¹cm⁻¹): 7000 M⁻¹cm⁻¹

光程长度 (cm): 1 cm

酶体积 (mL): 0.12 mL

时间 (分钟): 2 min

低酶活性示例

低活性

吸光度变化小且反应时间较长的情况。

ΔA (吸光度变化): 0.05

总体积 (mL): 3.5 mL

消光系数 (M⁻¹cm⁻¹): 6000 M⁻¹cm⁻¹

光程长度 (cm): 1 cm

酶体积 (mL): 0.1 mL

时间 (分钟): 10 min

其他标题
理解酶活性与比活性:综合指南
掌握生物化学中酶活性的原理、计算和应用。

什么是酶活性?

  • 定义和单位
  • 为什么测量酶活性?
  • 酶活性与比活性
酶活性量化了酶在单位时间内将底物转化为产物的催化能力。通常以单位(U)表示,其中一单位是在指定条件下每分钟催化1微摩尔底物转化的酶量。
酶活性单位

酶活性示例

  • 如果酶在1分钟内转化2 μmol底物,其活性为2 U。
  • 比活性通过将酶活性除以蛋白质含量(U/mg)来计算。

使用计算器的分步指南

  • 输入数据收集
  • 计算过程
  • 解释结果
要使用计算器,请收集您的实验数据:吸光度变化、总反应体积、消光系数、光程长度、酶体积、反应时间,以及可选的蛋白质含量。将这些值输入计算器字段。
计算步骤

分步示例

  • 输入 ΔA = 0.25, V_total = 3.0 mL, ε = 6220 M⁻¹cm⁻¹, d = 1.0 cm, V_enzyme = 0.1 mL, t = 5 分钟。
  • 计算器计算酶活性,如果提供蛋白质含量,还会计算比活性。

酶活性测量的实际应用

  • 临床诊断
  • 制药研究
  • 生物技术和质量控制
酶活性测量在临床诊断(如肝功能测试)、制药研发(如药物筛选)和生物技术(如酶生产质量控制)中至关重要。
科学和工业应用

应用示例

  • 测量血液中ALT/AST活性以评估肝脏健康。
  • 在蛋白质纯化过程中评估酶纯度。

常见误解和正确方法

  • 误解吸光度数据
  • 忽略光程长度
  • 错误的单位转换
常见错误包括使用错误的消光系数、忽略光程长度调整或单位转换不当。始终确保您的数据符合要求的单位和条件。
避免计算错误

误解示例

  • 使用ε单位为L/(mol·cm)但输入体积为μL而不是mL。
  • 计算比活性时忘记除以蛋白质含量。

数学推导和示例

  • 酶活性公式
  • 比活性计算
  • 详细计算示例
酶活性的标准公式为:活性(U) = (ΔA × Vtotal) / (ε × d × Venzyme × t)。比活性为活性(U)除以蛋白质含量(mg)。
计算示例

数学示例

  • 给定 ΔA = 0.25, V_total = 3.0 mL, ε = 6220 M⁻¹cm⁻¹, d = 1.0 cm, V_enzyme = 0.1 mL, t = 5 分钟:活性 = (0.25 × 3.0) / (6220 × 1.0 × 0.1 × 5) = 0.0024 U。
  • 如果蛋白质含量 = 0.5 mg,比活性 = 0.0024 U / 0.5 mg = 0.0048 U/mg。